Уход за оплодотворенной икрой включает в себя комплекс мероприятий, направленных на достижение максимальной выживаемости зародышей в заводских условиях. На икру солнечный свет действует губительно, поэтому ее содержат в темноте, а все работы с икрой проводят при слабом рассеянном свете. В их число входят:
Проведение профилактической обработки икры от заболеваний:
- однократно при закладке икры на инкубацию раствором йодинола (концентрация 1:10000 при рН не более 7,5, экспозиция 10 мин) или в 0,5%-м растворе формалина в течение 3 мин;
- раствором малахитового зеленого (концентрация 1:200000, экспозиция 30 мин в проточной воде – 1 раз в 7–10 дней). Обработка необходима при наличии инкубационного отхода в живой икре более 3%;
- раствором формалина (в случае расслабления оболочки икры) в концентрации 1:4000 (1 г 40%-го формальдегида растворяют в 4 л воды) (купание икры в 0,01%-м рабочем растворе формалина), экспозиция – 10 мин. Обработка проводится после наступления стадии пигментации глаз с периодичностью 1 раз в 7 дней.
Ежедневные измерения температуры воды в инкубаторах и содержания в ней кислорода
Развитие зародышей непосредственно зависит от температуры воды, а от со- держания в ней кислорода – не только их развитие, но и выживаемость.
Температуру воды и содержание в ней кислорода обязательно измеряют 2–3 раза в сутки. Усредненные данные ежедневно заносят в журнал гидрохимического анализа, а усредненные данные о температуре воды – в журнал градусо-дней и используют при ежедневном расчете количества градусо-дней (суммы набранного тепла) по каждой партии лососей.
Установка нормативной проточности (расхода воды) в инкубационных аппаратах и ежедневное слежение за расходом воды в этих аппаратах. В инкубаторах Аткинса расширенного вмещения (насыпного типа) (Pazifik II) устанавливается про- точность из расчета 35–40 л/мин; в боксах-инкубаторах ящичного типа (Pazifik I) – 50–80 л/мин, в вертикальных инкубаторах NOPAD – 80–100 л/мин на одну стойку из 5 инкубаторов.
Следует учитывать, что за 10–12 сут до предполагаемого начала выклева эмбрионы становятся особенно чувствительными к недостатку проточности и содержания в воде кислорода, вследствие чего непосредственно в самих инкубаторах возможны массовые заморные явления. Поэтому за 10–12 сут до предполагаемого выклева свободных эмбрионов в инкубаторах устанавливают максимальный (в пределах нормативного лимита) уровень расхода воды.
Ежедневные наблюдения в инкубационных аппаратах на предмет отсутствия в них турбулентности воды, а следовательно, и незапланированного перемешивания икры. При возникновении турбулентности следует незамедлительно ее устранить путем регулирования воды в кране.
Ежедневный осмотр икры в целях оценки ее санитарного состояния – на наличие погибшей икры, заиления, а если икра поражена какими-либо заболеваниями (например, сапролегнией или расслаблением оболочки), то необходимо определить, распространяется ли это заболевание далее на живую икру.
Защита икры от воздействия прямых источников света. Воздействие света губительно влияет на развитие зародышей. Поэтому обязательно используются специальные покрытия, обычно из прозрачного оранжевого пластика, отражающие свет, которыми накрывают инкубационные аппараты.
Проведение стрессирования икры в целях обнаружения части неоплодотворенной икры или погибшей на ранних стадиях развития зародышей, но с некоагулированным белком, по цвету не отличающейся от живой икры (рис. 38).
Для этого икру на стадии четко выраженной пигментации глаз отбирают из инкубационного аппарата в пластиковую сетчатую круглую корзину с использованием шланга. По принципу сифона вода и вместе с ней икра из инкубационного аппарата поступают по шлангу в корзину. На следующие сутки у стрессированной неоплодотворенной или погибшей икры белок будет коагулирован и она побелеет. Стрессирование икры можно проводить и непосредственно в инкубационных аппаратах путем ее активного перемешивания. Однако в этом случае часть нежизнеспособных икринок может не побелеть, что впоследствии негативно отразится на эффективности выборки инкубационного отхода.
Рыхление икры в инкубационных аппаратах для предупреждения повышенной смертности эмбрионов. Заиление, слёживание, «завоздушивание» икры, наличие большого количества погибшей икры, поражение грибковой инфекцией (сапролегниоз) – все эти неблагоприятные условия по отдельности или в комплексе являются существенным фактором риска для развития и здоровья эмбрионов. В результате слёживания икры в инкубационных аппаратах нарушается ее омываемость водой, а ток воды, проходящий снизу вверх на различные участки поверхностных слоев икры, создает её непрерывную турбулентность, часто приводящую к существенному повышению инкубационных отходов.
Рис. 38. Стрессовый способ отборки икры, Таранайский ЛРЗ, Сахалинская область
Первым обязательным условием является ориентировочное определение 7-го этапа эмбрионального развития по оценке возраста эмбрионов с начала их оплодотворения до момента осмотра по текущему журналу градусо-дней (по сумме на- бранного тепла и количеству суток). Например, при развитии эмбрионов кеты при средней температуре воды 6,5–7ºС следует приступать к ее осмотру на 27–30-е сутки от начала ее оплодотворения при 190 градусо-днях.
Необходимо учитывать, что при пониженной температуре инкубации сроки эмбрионального развития лососей существенно удлиняются, а количество набранного эмбрионами тепла уменьшается. Например, на ЛРЗ Магаданской области начало 7-го этапа эмбрионального развития кеты в условиях содержания икры при температуре воды 2,4ºС отмечается только на 44-е сутки при достижении 157 градусо-дней. И наоборот, в условиях содержания икры при высокой температуре воды (порядка 10ºС) наступление 7-го этапа эмбрионального развития происходит уже на 20–21-е сутки, сумма набранного тепла увеличивается до 200–210 градусо-дней.
Вторым обязательным условием для принятия решения о проведении рыхления икры является предварительный осмотр эмбрионов с целью определения того, что желточная пробка закрыта, 6-й этап эмбрионального развития завершен и наступил 7-й этап, при котором эмбрионы уже менее чувствительны к механическим воздействиям.
Для этого живую икру в количестве 100 шт. помещают в чашку Петри, наполненную водой из инкубатора. Чашку Петри с икрой ставят на ровную поверхность, покрытую черной тканью. Затем приступают к визуальному осмотру икры на пред- мет обнаружения, что процесс эпиболии – обрастание желточного мешка бласто
дермой (закрытие желточной пробки икринки) – завершен. При поверхностном визуальном обследовании заключение о том, что этот процесс завершен, может быть сделано на основании того, что на поверхности одного из полюсов икринки не просматривается беловатое кольцо. Если среди осмотренных 100 икринок бу- дут обнаружены хотя бы 1–3 икринки с наличием беловатого кольца, то рыхление икры не проводят и ждут завершения стадии эпиболии.
В целях подтверждения того, что 6-й этап эмбрионального развития завершен и наступил 7-й этап, дополнительно проводится прижизненная оценка икринок. Икринку медленно и аккуратно перекатывают между пальцами до того момента, когда ее оболочка станет прозрачной и эмбрион с его функциональными органа- ми и системами станет видимым под микроскопом (бинокуляром). Затем эмбрион аккуратно извлекают из-под оболочки и подсчитывают число сегментов и длину эмбриона (оптика бинокуляра обязательно должна быть оснащена измеритель- ной шкалой). Определение этапа и стадии развития эмбрионов должно осуществляться по книге А. И. Смирнова (1975) не менее чем на 10 эмбрионах.
При невозможности по каким-либо причинам определения 7-го этапа эмбрионального развития лососей или сомнений, что этот этап наступил, рыхление икры в инкубационных аппаратах недопустимо.
Рыхление икры с 7-го этапа эмбрионального развития проводится с частотой 1 раз в 3 суток до 12-го этапа эмбрионального развития (выклева свободных эмбрионов). Однако это необходимо делать с особой осторожностью. Для рыхления используется специально изготовленный сачок (рис. 39)
Рис. 39. Сачок для рыхления икры
К деревянной рейке длиной 600–700 мм прикреплена круглая металлическая рамка Ø 60–70 мм, изготовленная из проволоки толщиной 3–4 мм. Проволока туго обшивается мелкоячеистой безузелковой делью, размер ячеи которой зависит от диаметра икринок (обычно 3–4 мм).
По окончании 9-го, а также на 10-м этапе развития эмбрионов отходы при механических воздействиях самые минимальные. Разрешается проводить рыхление, «душевание», стрессирование икры, выборку отходов, а также перевозку ее в транспортировочных контейнерах.
На 11-м этапе перечисленные рыбоводные работы (кроме рыхления, перемешивания в инкубационных аппаратах и выборки отходов ручным способом) проводить не рекомендуется.
Выборка погибшей, неоплодотворенной икры (отхода) механическим, ручным, флотационным способами. Выборка отхода осуществляется на вторые – третьи сутки после стрессирования икры.
Сортировка, выборка отходов икры любым из рекомендованных способов на ЛРЗ Магаданской области осуществляется на стадии пигментации глаз при хорошо выраженном глазке на 9-м этапе эмбрионального развития лососей. Для кеты, горбуши и кижуча эти мероприятия обычно проводятся в среднем на 34–35 сут при 270–280 градусо-днях от момента оплодотворения, для нерки – на 35–40 сут при 280–330 градусо-днях.
Однако необходимо учитывать, что формирование этого этапа зависит от температуры водоисточника, питающего ЛРЗ. Результаты наблюдений за продолжи- тельностью инкубации тихоокеанских лососей до формирования начальной стадии пигментации глаз (9-го этапа эмбрионального развития) на ЛРЗ Магаданской области представлены в табл. 4. Эти данные рекомендуются к использованию для организации работ, связанных с любыми механическими воздействиями на икру. Организация этих работ напрямую зависит от качества обследования икринок и определения стадий и этапов развития тихоокеанских лососей на ЛРЗ.
При наличии большого количества погибших икринок в основном проводят выборку механизированным способом. При этом способе удаления отходов используют икроотборочные (сортировочные) машины J-SORTER с установленными в них фотоэлементами (рис. 40)
Рис. 40. Модификации машин J-SORTER для сортировки икры
Машины укомплектованы несколькими съёмными дисками с отверстиями, со- ответствующими размерам икринок. Точность сортировки живой икры от неоплодотворенной и погибшей в этих машинах приближается к 99%.
Икру загружают в приемную емкость (рис. 41 слева) и пропускают на вращающихся съемных дисках через фотоэлементы, установленные в машине. В результате побелевшая икра «выстреливается» в одну емкость, а оранжевая – в другую (рис. 41 справа).
Таблица 4. Продолжительность инкубации икры лососевых рыб до начала стадии пигментации глаз (9-й этап эмбрионального развития)
Годы наблюде- ний |
Кета | Горбуша | Кижуч | Нерка | ||||||||
t,°С |
продолжительность инкубации |
t,°С |
продолжительность инкубации |
t,°С |
продолжительность инкубации |
t,°С |
продолжительность инкубации | |||||
сут | градусо- дни | сут | градусо- дни | сут | градусо- дни | сут | градусо- дни | |||||
1983 | 5,3
3,8–7,8 |
43
31–59 |
228
217–238 |
8,7
8,0–9,2 |
27
26–29 |
235
231–238 |
4,8
3,7–6,4 |
48
37–59 |
228
218–238 |
– | – | – |
1984 | 6,4
5,4–6,8 |
35
34–39 |
225
212–231 |
6,5
6,5–6,7 |
35
34–35 |
227
226–228 |
4,3
3,8–5,8 |
51
39–58 |
222
219–225 |
– | – | – |
1985 | 5,1
2,4–7,9 |
45
30–92 |
231
224–236 |
7,7
7,6–7,7 |
30 | 230
227–231 |
– | – | – | – | – | – |
1986 | 8,4
7,0–9,1 |
28
25–33 |
234
225–234 |
8,3
8,0–9,4 |
28
25–29 |
233
231–234 |
– | – | – | – | – | – |
1987 | 7,8
6,6–8,5 |
30
28–34 |
231
225–238 |
– | – | – | – | – | – | – | – | – |
1988 | 7,7
6,6–8,9 |
30
28–32 |
230
212–248 |
8,1
7,9–8,6 |
26
25–26 |
210
207–215 |
7,1
6,8–7,4 |
33
32–34 |
233
231–237 |
– | – | – |
1989 | 9,2
7,3–10,4 |
27
26–30 |
249
219–270 |
– | – | – | 6,5
6,0–7,4 |
35
33–36 |
227
215–244 |
8,6 | 27 | 232 |
1991 | 8,5
8,2–8,8 |
30
27–34 |
252
230–283 |
– | – | – | – | – | – | – | – | – |
1993 | 6,7
5,6–7,5 |
39
32–46 |
259
228–290 |
– | – | – | – | – | – | – | – | – |
1994 | 7,4
6,8–8,0 |
37
31–41 |
271
232–302 |
– | – | – | – | – | – | 7,5
7,4–7,5 |
35
34–35 |
257
251–261 |
1996 | 7,8
7,5–8,1 |
33
32–35 |
256
240–276 |
– | – | – | 7,7
7,5–7,8 |
32
31–33 |
245
243–247 |
7,8
7,8–7,9 |
42
40–43 |
326
315–336 |
1997 | 8,7
7,9–9,3 |
32
31–33 |
279
261–290 |
– | – | – | – | – | – | – | – | – |
Рис. 41. Механизированная сортировка икры, машина J-SORTER
При наличии большого количества погибших икринок можно вести выборку флотационным способом – «купание» икры в 10–12%-м растворе поваренной соли. При выборке отхода этим способом в условиях инкубации икры в аппаратах Аткинса расширенного вмещения (насыпного типа) наиболее удобно пользоваться аппаратом-носилками (рис. 42).
Рис. 42. Аппарат-носилки для выборки икры флотационным (солевым) способом:
а – общий вид, б – вид сбоку
Икру из инкубационного аппарата загружают совком в аппарат-носилки, при этом его емкость рассчитана на емкость одного его отсека (100–120 тыс. икр. кеты). Аппарат-носилки с икрой погружают в ванну с раствором поваренной соли, нежизнеспособные икринки, имеющие другую плотность, чем живые икринки, всплывают на поверхность аппарата и их удаляют совком. Длительность выборки из аппарата всплывших икринок не должна превышать 10–20 с. После выборки «чистая» живая икра загружается в инкубационные аппараты – рукав придонной части носилок направляется в отсек инкубатора и развязывается, икра при этом равномерно распределяется по отсеку. Наличие двух-трех таких аппаратов-носилок позволяет вести выборку икры поточно, без простоев. Бригада из четырех человек в течение 1 ч может провести выборку от 0,8 до 1 млн икринок.
При небольшом отходе выборку погибших икринок следует проводить ручным способом. Для этого используют специальный стол со сливным отверстием (рис. 43). Икру загружают совками или ковшиками в емкости (ведра, тазы). Затем раскладывают на рамки, предназначенные для инкубации икры в аппаратах Аткинса рамочного типа (рис. 44, 45).
Рис. 43. Стол для ручной выборки инкубационных отходов, Анюйский ЛРЗ, Хабаровский край
Рис. 44. Рамка для инкубации икры тихоокеанских лососей, используемая для выборки инкубационных отходов ручным способом
Рис. 45. Выборка отходов икры ручным способом на Курильском ЛРЗ, Сахалинская область
Выборку икры проводят в проточной воде. Нежизнеспособные икринки удаляют пинцетом, обычно изготовленным из бамбука, наконечники которого обмотаны медной проволокой. Из этой же проволоки для фиксации икринок на каждом из его наконечников монтируют колечки в зависимости от размера икринок. Производительность такой выборки невысока, но она отличается высоким качеством и практически полной выборкой отхода.