Одним из важных условий при искусственном разведении рыб является определение влияния механических воздействий на состояние зародышей в период инкубации икры, так как именно в это время осуществляется выборка погибшей икры, ее рыхление в инкубационных аппаратах, «стрессирование» и другие работы по уходу за ней.
Для того чтобы предупредить увеличение отходов оплодотворенной икры, не- обходимо знать, на каких стадиях эмбрионального развития следует ожидать повышения отходов в результате механических воздействий.
В табл. 2 представлены данные, полученные в экспериментальных условиях (Смирнов, 1955). Икра инкубировалась при температуре воды 8,0–9,6ºС. В первой серии икринки подвергались воздействию вибрации в течение 70 с. Во второй серии воздействие длилось в течение 210 с.
В табл. 2 показано, что в ранний этап развития зародышей (1-й этап) наименьшие отходы икры наблюдались через 2 и 5 ч от начала оплодотворения, а после 8 ч от момента оплодотворения (2-й этап эмбрионального развития) увеличивались при более продолжительной вибрации.
С началом гаструляции (4-й этап эмбрионального развития) чувствительность икры к механическим воздействиям возрастает и одинаковое воздействие на стадии хорошо выраженного «зародышевого узелка» вызывает примерно вдвое больший отход, чем после воздействия на стадиях дробления (Смирнов, 1975).
Отметим, что при температуре воды ниже 8ºС формирование этапов и стадий развития зародышей более продолжительное. Это необходимо обязательно учитывать при выборке отхода на заводах и транспортировке икры с пунктов ее сбора.
Таблица 2. Отход икры осенней кеты, вызванный воздействием вибратора на ранних этапах эмбрионального развития (по Смирнову, 1955)
|
Возраст после оплодотворения |
Этап, стадия развития |
Отход икры, % | |
| 1-я серия | 2-я серия | ||
| До помещения икры в воду | 0,9 | 0,5 | |
| 15 мин | Интенсивное обводнение | 27,3 | 86,5 |
| 30 мин | Продолжается набухание | 68,1 | 89,0 |
| 1 ч | Продолжается набухание | 8,6 | 16,6 |
| 2 ч | Набухание заканчивается | 1,0 | 5,6 |
| 3 ч | 1-й этап. Формируется зародышевый бугорок | 6,9 | 18,2 |
| 5 ч | 1-й этап. Продолжается формирование зародышевого бугорка | 1,0 | 3,3 |
| 8 ч | 2-й этап. Дробление зародышевого диска. У части икринок два бластомера | 3,5 | 13,7 |
| 11 ч | 2-й этап. Дробление зародышевого диска. У икринок 2–4 бластомера | 4,4 | 11,6 |
| 1 сут | 2-й этап. Дробление зародышевого диска. До 16 бластомеров и больше | 7,3 | 13,2 |
| 1,5 сут | 2-й этап. Крупноклеточная морула | 7,7 | 15,7 |
| 2 сут | 2-й этап. Среднеклеточная морула и у отдельных икринок мелко- клеточная морула | 7,8 | 17,4 |
| 3 сут | 3-й этап. Мелкоклеточная морула, у некоторых икринок бла- стула | 8,4 | 14,5 |
| 4 сут | 4-й этап. Образование зародышевых пластов. У некоторых икринок начинается гаструляция | 7,0 | 16,3 |
| 5 сут | 4-й этап. «Перстневидная стадия» | 11,8 | 15,4 |
| 6 сут | 4-й этап. Четко обозначился «зародышевый узелок» | 18,5 | 32,5 |
| 8 сут | 4-й этап. Формируется «зародышевая полоска» | 5,2 | 9,4 |
| 10 сут | 5-й этап. 6-8 сегментов, намечаются зачатки глаз | 1,6 | 17,8 |
| 12 сут | 5-й этап. Сегментов 20 и более, обрастанием бластодермой охвачено около половины желточного мешка | 3,7 | 7,8 |
| 15 сут | 6-й этап. У одних эмбрионов 47–48 сегментов, пульсирует сердце; у других до 52 сегментов, завершается эпиболия | 20,5 | 24,7 |
|
18 сут |
7-й этап. Миотомов 60 и более, на желточном мешке формируется сосудистая сеть |
0,8 |
1,2 |
В табл. 3 приведены данные по отходам икры кеты при механических воздействиях на различных этапах эмбриогенеза, полученные в экспериментальных условиях на одном из рыбоводных заводов Магаданской области (Ольской ЭПАБ) (Хованская, 2008).
Таблица 3. Отход икры при механических воздействиях на Ольской ЭПАБ с 6-го этапа эмбрионального развития (инкубация при температуре воды от 6,4 до 0,7ºС)
| Температура инкубации, ºС | Возраст эмбриона, сут/градусо- дни |
Этап развития |
Стадии развития, количество сегментов, длина эмбриона |
Отход икры, % |
| 3,6*
3,6* |
30/107
43/153 |
6-й | Завершается процесс эпиболии – обрастание желточного мешка бластодермой. Начинает обосабливаться задняя часть тела зародыша и дифференцируется хвостовая почка от поверхности желточного мешка, насчитывается 46–47 сегментов, длина 4,8–5,0 мм
Завершен процесс эпиболии – желточный мешок оброс бластодермой; задняя часть тела зародыша обособлена от поверхности желточного мешка. К концу этапа задняя часть туловищного отдела до 29 сегмента отделяется от желточного мешка. Увеличивается подвижность эмбрионов. Они поводят из стороны в сторону хвостом и временами совершают волнообразные движения. Длина зародыша 6,5–7,0 мм, у основной массы зародышей насчитывается до 58–59 сегментов, из которых 16–17 хвостовых |
До 100
91 |
| 2,4
2,3
1,5 |
44/157
58/190
62/196 |
7-й | Начало кровообращения, отмечается слабый ток крови, эритроцитов мало и они имеют светлую окраску. Длина зародышей 6,5–7,2 мм, стадия развития от 58 до 62–63 сегментов, из которых 40–41 туловищные; закладываются грудные плавники.
Длина зародыша 7,2–7,3 мм, насчитывается от 62 до 65 сегментов. Начало формирования на желточном мешке сосудистой сети (подкишечно-желточной системы кровообращения). Развитие подкишечно-желточной системы кровообращения. Хвостовая артерия и вена удлинняются, подкишечно-желточная вена опускается ниже, число капилляров на желточном мешке увеличивается. Длина зародыша 7,3–7,8 мм, стадия 65–71 сегмент |
76
12
56 |
| 2,0 | 67/205 | 8-й | Сосуды обильно заполняются эритроцитами, имеющими интенсивную окраску. Начинается кровоснабжение глаз. Длина эмбрионов 8,0–8,2 мм; число сегментов достигло максимума – 72–73, из которых 30–31 хвостовые | 21 |
| 1,9 | 74/218 | Возникновение кардинальных вен. На значительной части задней половины желточного мешка образуется сеть капиллярных сосудов. Печень достигла довольно крупного размера, расположена между 5–9-м сегментами. Закладка кардинальных вен и смешанного кровообращения. В глазах отмечаются первые зерна меланина. Длина эмбрионов 10,5–11,0 мм | 54 | |
| 2,0
2,0
0,7 |
80/230
83/236
98/250 |
9-й | Увеличивается высота головы зародыша, ускоряется рост нижней челюсти, углубляется воронка ротовой полости. Начало пигментации глаз, пигмент просматривается только под микроскопом. Удлинившийся хвостовой отдел превышает на 1/3 общую часть тела. Число хвостовых сегментов сокращается до 27–28
Возникновение и развитие печеночно-желточной системы кровообращения. В проходящем свете глаз виден маленькой серой точкой. Хорошо выражена пигментация глаз, которые видны в проходящем свете. Хвостовой отдел занимает 37% общей длины эмбриона. В месте закладки опорных и мышечных элементов хвостового плавника появляются петли капилляров. Капилляры покрывают всю поверхность желточного мешка. Длина эмбрионов до 12–14 мм |
21
35
1,5 |
| 0,7 | 99/251 | 10-й | В начале этапа длина эмбрионов 14 мм и более. Выявляются зачатки анального, а затем спинного плавников.
К концу этапа длина эмбрионов до 19–20 мм, число хвостовых сегментов сокращается до 22–23. Общее количество сегментов зародыша сокращается до 65–63 |
Менее 1 |
| 0,7 | 181/308 | 11-й | Развитие подвижности челюстей и жаберных крышек, завершение инкубации. Выход зародышей из-под оболочки икры при их длине от 20 до 23 мм | За 3 дня до завершения инкубации менее 1 |
* Средняя температура инкубации
Для определения устойчивости икры к механическим воздействиям на различных этапах эмбриогенеза на Ольской ЭПАБ опытную партию икры кеты, инкубирующейся при температуре воды от 6,4 до 0,7ºС, ежедневно в течение 181 сут (по 100 икр.) подвергали вибрации на рыбоводных рамках в течение 20 с (частота 3 Гц, амплитуда 2 см). Через сутки после вибрации подсчитывали процент погибших икринок. За период эксперимента использовали 18,1 тыс. икр. кеты.
Результаты опыта показали, что устойчивость эмбрионов к механическим воз- действиям на протяжении инкубации повышалась (рис. 37). Однако до 6-го этапа эмбрионального развития гибель икры составляла 100%. В это время происходило образование зародышевых пластов, головы и туловища зародыша, обрастание желточного мешка бластодермой (эпиболия). После завершения процесса эпиболии чувствительность икры к травмам снижалась. Процесс эпиболии закончился на 43 сутки – 153 градусо-дней (средняя температура воды 3,6ºС). С этого времени отход от вибрации уменьшался и на 7-м этапе (58 сут, 190 градусо-дней) снизился до 12%.
Рис. 37. Устойчивость икры кеты к механическим воздействиям в процессе инкубации
Затем с развитием подкишечно-желточной системы кровообращения (62 сут, 196 градусо-дней) чувствительность икры к воздействию вибрации вновь повышалась (отход 56%). В начале 8-го этапа (67 сут, 205 градусо-дней) гибель эмбрионов снизилась до 21%. С закладкой кардиальных вен и смешанного кровообращения (74 сут, 218 градусо-дней) снова наблюдали повышение смертности до 54%, а к началу 9-го этапа (80 сут, 230 градусо-дней) – снижение смертности до 21%. С на- чалом функционирования печеночно-желточной системы кровообращения (231– 239 градусо-дней) гибель эмбрионов снова увеличилась до 35%. К 250 градусо- дням (98 сут) чувствительность икры упала до минимума и оставалась низкой до вылупления эмбрионов.
Таким образом, после завершения процесса эпиболии на 43 сут при 153 градусо-днях (средняя температура воды 3,6ºС) чувствительность эмбрионов кеты к механическим воздействиям резко снижалась. С закладкой кардиальных вен и смешанного кровообращения (74 сут; 218 градусо-дней) смертность повышалась до 54%. На 9-м этапе при 250 градусо-днях (98 сут) чувствительность к механическим воздействиям уменьшалась и оставалась низкой до самого вылупления эмбрионов.
Чувствительность эмбрионов резко повышалась в «критические» этапы раз- вития при формировании жизненно важных органов и функциональных систем. Поэтому устойчивость эмбрионов к механическому воздействию, несомненно, должна учитываться рыбоводами при проведении технологических операций, в частности при перевозке, стрессировании и переборке икры.
Таким образом, как показано в табл. 2 и 3, на ранних этапах инкубации икры (до окончания 6-го этапа развития эмбрионов) наблюдается высокая смертность зародышей и в связи с этим запрещается подвергать икру любым механическим воздействиям и проводить выборку отходов (Смирнов, 1963, 1975), в противном случае икра погибает.
С 7-го этапа эмбрионального развития для предупреждения слёживания икры допускается ее аккуратное рыхление непосредственно в инкубационном аппарате. С конца 9-го этапа эмбрионального развития (на стадии четко выраженной пигментации глаз) и до окончания 10-го этапа разрешаются механические воздействия (транспортировка икры, ее стрессирование, рыхление, душевание, переборка флотационным (через солевые ванны), механическим способами, а также
вручную).
С начала 11-го этапа эмбрионального развития до его окончания разрешается переборка икры вручную и ее перемешивание.
