Количество эритроцитов оценивается пробирочным методом с помощью камеры Горяева и микроскопа, например «Leiса». При подсчете эритроцитов используется лабораторный счетчик СЛ-1.
Для полноценного анализа на определение общего количества эритроцитов должно заполняться 10 пробирок, в которые наливают градуированной пипеткой по 4 мл 0,85%-го физиологического раствора, изготовленного в аптеке. В случае забора крови в объеме не 20, а 10 мкл наливают в 2 раза меньше этого раствора, т. е. всего по 2 мл. Затем в подготовленные пробирки выдувают кровь, осторожно промывая капилляр несколько раз. К камере Горяева притирают покровное стекло до образования ньютоновских колец. По истечении 1–2 мин содержимое уже можно рассматривать. Для этого пипеткой Сали после промешивания, заполнения содержимым пробирки и удаления его первой капли заполняют камеру Горяева. Затем начинают подсчет эритроцитов под микроскопом в 5 больших или в 80 малых квадратах, расположенных по диагонали (рис. 91а).
а б
Рис. 91. Схема подсчета эритроцитов в камере Горяева: а – 80 малых (5 больших) квадратов, расположенных по диагонали, в которых необходимо считать эритроциты; б – расположение эритроцитов (окрашены на схеме в черный цвет), которые следует считать в 1 из 5 больших квадратов (в 16 малых квадратах)
Подсчет эритроцитов в каждом из 5 больших квадратов, в состав которых вхо- дит 16 малых квадратов, ведется следующим образом: считают все эритроциты, расположенные в центре большого квадрата, а также справа, снизу и в нижнем левом углу.
Количество эритроцитов в 1 мкл крови определяют по формуле:
Х = (А × 4000 × 200) / 80,
где Х – количество эритроцитов в 1 мкл крови; А – количество подсчитанных эритроцитов в 80 малых или 5 больших квадратах; 4000 – множитель, приводящий результат к объему 1 мкл; 200 – рабочее разведение; 80 – число просчитанных малых квадратов.
Для упрощения подсчетов количества эритроцитов в 1 мкл крови достаточно умножить их число, просчитанное в 80 малых или в 5 больших квадратах (А), на 10 000.
Количество подсчитанных эритроцитов записывается или в млн шт./мм3 крови, или в тыс. шт./мм3 крови.