Сроки проведения комплексного биолого-морфофизиологического обследования молоди тихоокеанских лососей приурочены к ее выпуску с лососевых рыбоводных заводов или к окончанию технологического цикла при ее двухлетнем выращивании, а также совпадают с покатной миграцией природной молоди – в течение III декады мая – II декады июля.
Сбор материала для морфофизиологической оценки проводится однократно перед выпуском молоди в естественные водоемы и в случае ее двухлетнего со- держания – однократно по окончании каждого технологического цикла.
В целях проведения более объективной характеристики биологического качества заводской молоди ее оценка проводится по вычислению средневзвешенных показателей у молоди, выращенной в разных условиях (или у молоди разных возрастных групп) на одном заводе.
Для этого используют следующую формулу:
Мср = ((Р1 × M1) + (Р2 × M2) + (Р3 × M3) +… + (Рn × Mn)) / (P1 + Р2 + Р3 +…+ Pn),
где: Мср – средняя масса тела всей молоди; Р1, Р2, Р3, Рn – количество молоди соответственно в первом, втором, третьем и последнем бассейне, шт.; М1, М2, М3, Мn – средняя масса тела молоди соответственно в первом, втором, третьем и последнем бассейне, г.
Пример расчета:
В трех бассейнах содержится 2100 тыс. экз. молоди кеты.
В каждом бассейне определена средняя масса тела молоди:
- в 1-м круговом бассейне содержится 500 тыс. экз. молоди средней массой тела 1,0 г;
- во 2-м круговом бассейне содержится 600 тыс. экз. молоди средней массой тела 0,700 г;
- в 3-м бассейне дальневосточного типа содержится 1000 тыс. экз. молоди средней массой тела 0,400 г.
Необходимо вычислить среднюю массу тела молоди, находящейся в трех бассейнах.
Мср = ((500 × 1,000) + (600 × 0,700) + (1000 × 0,400)) / (500 + 600 + 1000) = (500 + 420 + 400) / 2100 = 1320 / 2100 = 0,629 г.
Следовательно, средняя масса тела молоди кеты, выращенной во всех трех бассейнах завода, составляет 0,629 г.
Объем сбора проб молоди с каждого завода для ее качественной оценки может быть неодинаковым и зависеть от количества и условий ее содержания перед выпуском (подращивание в круговых бассейнах при низких или повышенных температурах воды, прямоточных бассейнах дальневосточного типа, в естественных выростных прудах и т. д.). Количество экземпляров в общей пробе по каждому заводу должно составлять не менее 100 экз.
Рыба измеряется по следующим показателям: длина тела по Смитту – АС, длина до конца чешуйного покрова – АD, масса тела – Р, масса желтка – Рж, а так- же индексам внутренних органов (относительные массы): печени, сердца и желудочно-кишечного тракта (Правдин, 1966; Шварц и др., 1968; Смирнов и др., 1972). Кроме того, проводится расчет коэффициента упитанности по Фультону – Кф.
Физиологическая оценка молоди проводится по гематологическим показателям: количеству эритроцитов и лейкоцитов в единице объема крови (1 мм3), со- держанию гемоглобина (г/л), соотношению форменных элементов крови и плазмы (по величине гематокрита, %), а также морфологической картине крови по наиболее часто применяемым схемам.
Сбор крови для анализа осуществляется из хвостовой артерии малька в гепаринизированный микрокапилляр (пипетку Сали) объемом 20 мкл. При работе с молодью очень мелких размеров и невозможности взятия крови в этом объеме на микрокапилляр наносят отметку, делящую его надвое. Таким образом, набирают уже не 20, а 10 мкл крови.
В исследовании на определение содержания эритроцитов, гемоглобина и величины гематокрита в связи с малым количеством крови у одного малька используются в основном усредненные пробы (от 2 до 10 мальков в 1 пробе).
Общее количество экземпляров молоди, израсходованной на один полный гематологический анализ, зависит от массы тела рыб и может составлять от 15 экз. (крупноразмерная молодь в возрасте годовики – двухлетки) до 200 экз. (мелко- размерная молодь в возрасте сеголетка), а на биологический анализ – не более 25 экз. (крупноразмерная молодь) и не более 100 экз. (мелкоразмерная молодь).
Для забора крови мальков от 1 до 7 экз. в зависимости от их размеров раскладывают в ряд на фильтровальную (рис. 90) или другую бумагу, хорошо впитывающую влагу, сложенную в несколько слоев, таким образом, чтобы у края бумаги свисала их нижняя часть тела.
Отсечение хвоста у малька делается в непосредственной близости от ануса. Ножницы должны быть очень острыми, чтобы не получилось рваных краев в этом месте, из-за чего может быть затруднен забор крови. То есть она будет попадать в пипетку Сали порционно и будет в ней «завоздушиваться». При этом не получится забрать точное количество крови. Пипетку для забора крови нужно держать кончиком вниз под наклоном 40–45º. Перед каждой процедурой забора крови пипетку Сали обрабатывают в растворе гепарина в разведении 1:5000 Мед. и полностью выдувают из него этот раствор, чтобы снова не получилось «завоздушивания» крови в пипетке.
Рис. 90. Отсечение хвостовой части тела (а) и сбор крови (б) у мальков кеты в гепаринизированный капилляр